多酚类及其氧化产物的抗氧化作用多指其清除自由基的作用。自由基指含有未成对电子的原子、原子团或分子。生物体内自由基的生成途径主要有三条:①分子氧的单电子还原途径。这一过程产生102、.OH和H202。②酶促催化产生自由基。机体细胞液中的一些可溶性酶,如黄嘌呤氧化酶、醛氧化、脂氧化酶等都是常见的可产生自由基的酶。③某些生物物质的自动氧化生成自由基。一些蛋白质、脂类、低分子化合物的自动氧化,过氧化物与某些金属离子的氧化还原均可产生自由基。生物体内自由基处于生物生成体系与生物防护体系的平衡之中。一旦平衡被破坏,就会危害机体,发生疾病。需要外源的抗氧化剂清除自由基,保护机体正常运转。
抗氧化剂清除自由墓,依其作用的性质通常分为两大类:第一类为预防型抗氧化剂。这一类抗氧化剂可以清除链引发阶段的自由基,如SOD、CAT等酶以及金属离子络合剂等。第二类抗氧化剂是断链型抗氧化剂,可以捕捉自由基反应链中的过氧自由基,阻止或减缓自由基链反应的进行。
茶多酚及其氧化产物是一类含有多个酚性羟基的化合物,较易氧化而提供质子,具有酚类抗氧化剂的通性。尤其是B环上的邻位酚羟基或连位酚羟基较高的还原性,易发生氧化生成邻醌类物质,而提供的H+与自由基结合,使之还原为惰性化合物或较稳定的自由基,从而直接清除自由基,避免氧化损伤。另外,茶多酚及其氧化产物还可作用于产生自由基的相关酶类,络合金离子,可间接清除自由基,从而起到预防和断链双重作用。茶多酚及其氧化产物的抗氧化、清除自由基的作用已受到国内外学者的广泛关注,并对其作用效果和机理展开了广泛的研究。
松崎妙子等研究了4种儿茶素对猪油的抗氧化力,表明按等物质的量浓度的抗氧化活性顺序是:L-EGCG>L-EGC>L-ECG>L-EC;按等重量的抗活性顺序是:L-EGC>L-EC>L-ECG>L-EGCG。Oldreive,C研究指出,多酚可清除活性氮自由基引起的酪氨酸硝化作用和DNA碱基的脱氨基作用,从而可预防胃癌的发生。另有体外研究表明,茶多酚及L-EGCG对02-的清除能力强于维生素E和维生素C,并在一定浓度范围内随浓度增加而加强,至6×10-3mg/ml时清除率达到最高(>97%),对于Fenton反应产生的OH·,在最适浓度(0.043-O.100mg/ml)内清除率可达99%。LinJK对体外的60细胞研究表明,清除的0f能力呈如下顺序:EGCG>TF2(茶黄素单没食子酸酯)>TFi(茶黄素)>GA(没食子酸)>TF3(茶黄素双没食子酸酯>PG(没食子酸丙酯)。对H202的清除能力则为TF2>TF3>TFi,EG(PG,GA。VasylM.Sava研究指出,茶色素不论是从茶叶中直接提取而来,还是由茶多酚转化而来,都具有清除自由基的能力。茶儿茶索具有抗脂质过氧化作用,从而有益于延缓机体衰老。当机体内由于多种原因引起的自由基增多或维生素E和辅酶Q的保护不足时,生物膜中的磷脂发生过氧化作用,细胞坏而导致细胞的衰老。研究表明,茶儿茶素对脂质过氧化反应有抑制作用,其效果比现有服用的维生素E更为明显。
多酚类及其氧化产物具有丰富的活性羟基,它可与蛋白质等生物大分子通过氢键而结合,从而影响许多生理过程。它可以影响到许多酶的酶活。如它可增强抗氧化酶(如谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶、醌还原酶等)和Ⅱ相酶(如谷胱甘肽一硫转移酶)活性,抑制鸟氨酸脱羧酶、环加氧酶、鲨烯环氧酶、黄嘌呤氧化酶、胶原酶、细胞间质多属蛋白酶、蛋白激酶C、芳香羟胡NADPH-细胞色素C还原酶、端粒末端转移酶等多种酶活性,从而对许多病理过程起到显著的抑制作用;在大豆脂质系统抗氧化实验中发现,儿茶素类可与脂质体膜极性部分具有极强的亲和力,从而起到保护作用。TosllHashimoto也研究发现,儿茶素类可与脂质体系统脂双层膜具有高度亲和力,但亲和力存在差异,按如下顺序递减:ECG>EGCG>EC>EGqSekiya等对体外大豆脂过氧化物酶与茶叶中两种主要儿茶素EcG、EGCq机理进行了研究,认为ECG和EGoG对胎过氧化物酶的络合沉淀作用是主要的机制。
多酚类及氧化产物可络合诱导氧化的过渡金属离子,如Fe3+,Cu2+等,Fe3+离子可催化HaberWeiSs反应,使02生成危害性更大的.OH,Cu2+可催化低密度脂蛋白(LDL)氧化,Ca2+离子是钙调蛋白和蛋白激酶的组分,是体内的第二信使,当生物体处于逆境时,Ca2+浓度升高,可激活蛋白酶,促进黄嘌呤脱氢酶转变为氧化酶。萧伟祥等研究表明,茶多酚类及氧化产物可络合多种金属离子,茶黄素对Ca2+和铁离子的络合性较强,而对CLl+络合性较弱。最新体外研究表明,EGCG与Cu2+络合后,其抗氧化能力大大提高,达到原有抗氧化能力的2倍以上,另外,Mrr2+、Cl+、Mg2+和A13+对EGCG的抗氧化能力也有所提高。
生物机体由核酸、蛋白质、脂类等多种生物分子组成,这些成分易遭受自由基等因素的攻击而发生氧化、交联、聚合等反应,使其丧失正常功能,进而危及细胞功能和机体健康。大量实验证明,茶叶具有优异的抗氧化活性,这是使茶叶成为保健和治病良药的重要功能基础。Okayasu H等研究了各种红茶、绿茶及绿茶粉热水提取物的抗自由基效果,结果显示各种茶的提取物对超氧阴离子自由基、羟自由基、一氧化氮自由基均具有良好的清除效果。周才琼等研究了茶鲜叶、绿茶和茶多酚在体外模拟胃液pH条件下对N02-(亚硝酸根)的清除作用,结果显示很强的清除作用,其效果随处理时间延长而升高。
茶的抗氧化效果与其清除自由基的作用密切相关。概括来说,抑制自由基产生、直接清除自由基、激活生物体自身的自由基清除体系,这是茶多酚发挥其抗氧化功能的3大机制。
生物的衰老和死亡源于细胞的损伤和死亡。人体自然衰老与退行性疾病的发生过程,都伴随着细胞受氧自由基的氧化损害,造成组织器官和生物大分子的损伤。医学科学家研究认为,利用抗氧化剂预防或消除自由基所造成的氧化损伤,是预防和阻断癌症及心血管疾病发展的有效方法。茶多酚、茶色素等成分具有良好的抗氧化和清除自由基的功能,从而有效地保护生物细胞免受自由基的攻击和氧化损伤:而细胞寿命的延长,自然会延缓生物体的衰老速度。
目前已经证明,茶叶对抗衰老作用有贡献的成分是:茶多酚、茶多糖、茶氨酸和各种维生素等。
摘要 在照光和黑暗条件下研究了不同浓度的6-BA和GA+6-BA混合剂处理对油茶离体叶片衰老的影响.结果表明,在光条件下6-BA可以保持叶片细胞的超氧歧化酶(SOD)活性(为对照的129%),降低了膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的积累(为对照的47%),延缓叶绿素和蛋白质的降解.说明6-BA有延缓叶片衰老的作用,在黑暗条件下上述生理指标的水平较低,表明光对6-BA的作用有一定的增益效应.GA+6-BA混合剂处理没有明显效果.
关键词 6-苄氨基嘌呤;油茶叶片;延缓衰老
中图分类号 S794.401
Delayed Action of 6-BA on Detached-leaves
Senescence in Camellia oleifera
Hu Zhesen
Resources & Environment Department,Fujian College of Forestry,Nanping,Fujian 353001
ABSTRACT Experiments were carried out to study the effect of different concentration 6-BA solutions and 6-BA-GA mixtures on detached-leaves senescence of Camellia oleifera under illumination and dark,the results indicated that:under illumination,6-BA could maitain the activity of SOD,reduce the accumulation of chlorophyll and protein,therefore,6-BA played delayed action on leaves senescence of Camellia oleifera,The delayed acton of 6-BA on leaves senescence under dark tallied with that under illumination,but the degrees were lower.The 6-BA-GA mixture hardly had evident effect on senescence.
KEY WORDS Camellia oleifera,leaf,6-benzyladenine,senescence
促进油茶产量提高是林业工作者的紧迫任务,除了采取集约经营的一系列措施外,还必须努力探索其生长发育的内在生理生化机制.油茶叶片是积累干物质的源泉,如果能延缓叶片的衰老将会有效地增加产量.衰老被认为是一种氧化过程,是功能的衰退,是体内自由基累积导致膜脂脂质过氧化的结果〔1〕.离体叶片衰老容易调控,试验周期短.因此采取6-BA、GA等处理油茶离体叶片,然后测定与叶片衰老相关的超氧歧化酶(SOD)活性,过氧化作用产物丙二醛(MDA)含量、叶绿素和蛋白质含量等生理指标.为延缓油茶生长后期叶片衰老过程达到增产目的提供理论依据.
1 材料与方法
1.1 材料的处理
取枝梢下部2~3片成熟叶片为材料,钻取面积约为1.2cm2圆片,分别漂浮于1mg/L6-BA、5mg/L6-BA 溶液、6-BA+GA 混合液(各为2.5mg/L)和水中.每个处理取70~80个小圆片,各项处理分别光和暗两种条件下进行,室温25℃~27℃放置8天,每种处理重复3次.
1.2 生理生化指标测定
1.2.1 叶绿素含量测定 按Arnnan的方法取处理的圆叶片用95%乙醇研磨提取,滤液用721分光光度计测定光密度值,计算含量〔2〕.
1.2.2 蛋白质含量测定 取处理的圆叶片加0.2mol/L磷酸缓冲液(pH6.0)研磨匀浆,离心取上清液加入考马斯亮兰溶液于721分光光度计595nm波长处测光密度值,计算含量〔3〕.
1.2.3 SOD活性测定 将处理的圆叶片冲洗干净吸干后于4℃下加入0.05mol/L磷酸缓冲液(pH7.8)研磨匀浆,10000r/min离心20min,上清液用721分光光度计测定光密度值,计算酶活性,以抑制氮兰四唑光化还原50%为一个酶单位〔4〕.
1.2.4 MDA含量测定 取处理的圆叶加蒸馏水研磨匀浆,在提取液中加入0.5%硫代巴比妥酸溶液沸水浴中煮沸10min,3000r/min 离心15min,取上清液测532nm和600nm处的光密度,计算过氧化脂质含量〔5〕.
1、2、3、4—光处理 1′、2′、3′、4′—暗处理
1,1′—对照2,2′—5mg/L6-BA 3,3′—1mg/L6-BA
4,4′—6-BA+GA(各2.5mg/L)
附图 不同浓度6-BA处理对油茶叶片各生理指标的影响
FIGURE Effect of 6-BA with different concentrations on the
physiological indexes of Camellia oleifera leaves
2 试验结果
2.1 6-BA对油茶叶片叶绿素含量的影响
光照条件下5mg/L和1mg/L6-BA处理的油茶叶片的叶绿素含量分别为对照的115%和133%(经方差分析呈显著差异),暗条件下上述两种浓度的6-BA处理的叶片叶绿素含量分别为对照的106%和114%(附图).说明6-BA处理能维持较高的叶绿素含量,5mg/L6-BA处理的效果更佳,而且光照条件下有增益效应.
2.2 6-BA对油茶叶片蛋白质含量的影响
经过6-BA处理的油茶叶片蛋白质含量比对照的增加较多(附图).光照条件下以5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片蛋白质含量分别相当于对照的154%和120%.暗条件下上述两种浓度的6-BA处理的叶片蛋白质含量分别相当于对照的139%和118%.说明6-BA能有效地延缓叶片中蛋白质的降解从而延缓叶片衰老.也可以看出GA+6-BA混合液处理的叶片蛋白质含量与对照的无显著差异.
2.3 6-BA对油茶叶片SOD活性的影响
光照条件下以5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片SOD活性分别比对照的高29%和20%.暗条件下经上述两种浓度6-BA处理的叶片SOD活性分别比对照的高18%和13%.说明6-BA能维持叶片SOD活性较高水平,有效地防止叶片衰老.GA+6-BA混合液处理的叶片SOD活性与对照的也无明显差异(附图).
2.4 6-BA对油茶叶片MDA含量的影响
光照条件下经5mg/L和1mg/L6-BA处理的叶片MDA含量分别比对照的低27%和14%.暗条件下经上述两种浓度6-BA处理的叶片MDA含量分别比对照的低的22%和11%.说明6-BA能抑制油茶叶片的膜脂过氧化作用.GA+6-BA混合液处理的叶片MDA含量与对照的也无明显差异(附图).
3 结论与讨论
油茶叶片的光合色素、可溶性蛋白质含量、可以清除活性氧危害的SOD活性的降低和由于膜脂过氧化作用加强MDA含量增加而导致叶片衰老.以6-BA处理叶片可以明显影响这些生理过程.MDA的积累比对照少,SOD活性维持在较高水平,明显加强了细胞内清除自由基的能力,抑制膜脂的过氧化作用.Dhindsa等也发现激动素对燕麦叶片片段有防止MDA增加的作用〔6〕.可见细胞分裂素是通过影响蛋白质、类脂、色素等一系列代谢过程延缓叶片衰老的,以6-BA+GA混合液处理叶片对其生理过程无明显影响.
本试验结果,6-BA溶液的光照条件下处理叶片比暗条件下处理具有比较显著的效果.说明光对激素的作用有增益效应.表明以6-BA和GA等调节叶片衰老过程的效果可能因外界条件的差异而有所不同.
加入外源细胞分裂素可以延缓油茶叶片的衰老,延长光合器官的功能增加干物质,因此在林业生产实践上也具有参考价值.
*福建省教委科学基金资助项目
茶的种类多种多样,大致可以分为六种,绿茶、红茶、乌龙茶、黑茶、黄茶、白茶。,不同的人适宜喝不同的茶,喝对茶才能养人。
常运动、上班族,适宜喝绿茶、黄茶。绿茶属于非发酵茶,黄茶属于轻发酵茶,两者茶多酚含量显著高于红茶、黑茶。研究表明,茶多酚有利于维持体内儿茶酚胺的浓度,从而增加肌肉收缩能力,促进脂肪分解,绿茶中的咖啡因还会强化这一效果。另外,茶多酚的抗氧化作用可以消除运动中产生的自由基,减轻疲惫感和骨骼肌损伤,维持机体免疫力。所以建议常运动的人将绿茶或黄茶作为日常饮品。
上班族基本生活节奏较快,工作压力较大,绿茶和黄茶抗氧化作用最好,茶中的咖啡因也能帮着提神。绿茶还有很好的抗辐射作用,虽然手机和电脑的辐射很小,但每天接触时间比较长,也可以多喝点绿茶。
吃得油、血脂高,适宜喝红茶、黑茶。各种茶都有一定解腻降脂的作用。动物实验发现,黑茶中的熟普洱茶对营养性肥胖大鼠的降脂效果显著优于不发酵的绿茶,略优于半发酵的乌龙茶;另有研究发现,红茶和黑茶在降甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇方面都优于绿茶,所以吃得油腻或血脂高的朋友可以喝红茶和黑茶。
花茶健康益处各不同。除了绿茶、红茶、乌龙茶、黑茶、黄茶、白茶直接泡着喝,人们也会把菊花、玫瑰花、茉莉花等花草和茶叶混在一起泡成花茶。传统养生认为菊花能清火、玫瑰花可静神、茉莉助消炎,大家可以根据自身需求选择合适的花茶喝。
药茶不能随意喝。多种中药材如决明子、石斛、甘草、黄芪等都可以熬煮后代茶饮。不过,是药三分毒,中医要根据体质开药茶方,自己不可随意配着胡乱喝。
中医认为绿茶和黄茶性凉、红茶和黑茶性温,所以平时脾胃不太好的人和怕冷的人可以多喝点红茶和黑茶,而火气旺、长痘痘的人可以喝点绿茶和黄茶;茶中咖啡因有兴奋神经的作用,所以睡眠不好的人晚上最好别喝茶;另外,泡茶不要太浓,以免影响矿物质吸收。
白茶有三大养生功效,分别是提神醒脑、清凉解毒、三降三抗,独特的养生保健功效,向来就被大众所喜爱着。并且白茶所拥有的抗氧化性功效,也让白茶拥有独特的美容养颜功效,所以白茶还有一个别称,又叫做“女性美容茶”,在美容美白、消炎杀菌、去除皱纹、祛斑这一块作用效果是非常好的。为什么白茶的抗氧化功效如此强大呢?下面一起来看看其中原理。
所谓的“抗氧化性”,所指的就是抗氧化自由基的简称。
人体内的自由基是如此产生的呢?当人体和外界持续接触,包括呼吸、外界污染、放射线照射等因素,都会不断的在人体内产生自由基;并且这些条件下都会促使自由基的浓度不断的增加,简称为氧化压力。当氧化压力越大的时候,身体内自由基含量也就越高,这个时候身体的抗氧化系统就面料奔溃的危险,所以我们需要通过外界食物来提供抗氧化的物质,帮助清除一些自由基,来有效的维护身体机能,不受自由基的侵害。
要知道,如果人体产生大量的自由基,而又得不到清理的时候,那么往往会导致身体衰老加速,并且产生其他的疾病。如果可以消除身体内过量自由基的话,那么对于许多自由基而引起的疾病都可以起到预防的作用;同时还可以起到抵抗衰老、延年益寿的重要作用。
实验研究表明,超氧化歧化酶、过氧化氢酶、抗氧化剂等,都可以有效的清除掉身体内过量的自由基离子。
白茶,是不炒不揉,自然晾晒制成的,所以保留了很多鲜叶的营养物质,如大量的多酚类物质,降低了多酚类的氧化成分,所以自由基含量是非常低的。并且白茶中所含的丰富黄酮类化合物,堪称是天然的饮料;重要的是,茶多酚里面所占大部分含量的儿茶素,对自由基有非常强大的还原作用,是一种纯天然的抗氧化剂。
尤其是对于老白茶来说,在长时间的贮存中,里面所含的黄酮类物质含量会随着时间的推移而不断的增加,所以说,储存年份越久的老白茶,那么代表着它的抗氧化效果是更加好的。所以,大家可以在生活中常喝些白茶,来清除、对抗身体内的自由基,这样的话,在抵抗衰老、延年益寿这方面的功效是非常不错的。
上述文章中已经明确的表明,饮用白茶的养生功效是非常棒的,可以帮助清除自由基。而在白茶的众多种类中,以白毫银针的抗氧化效果是最强大的,在许多护肤品中,就有许多品牌的核心成分就是白毫银针的提取物。
白毫银针,是中国十大名茶之一,不仅仅拥有悠久的历史,而且早在百年钱就已经是畅响海外的产物。长期饮用白毫银针,对肌肤有舒缓、平复、强韧的功效;因此,如果你也想要对抗、清除身体内自由基的话,那么可以常喝白茶哦。
并且,在等级中的话,自然是老白茶的抗氧化功效是最为强大的,所以大家有条件的话,可以选择一些5-7年以上的白茶饮用;贮存越长时间的白茶,那么过程中就形成更多的抗氧化物质,所以选择饮用老白茶的抗氧化效果是最佳的。
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