苦丁茶叶中总黄酮的含量测定

摘　要　为了测定苦丁茶叶中总黄酮的含量，利用黄酮类化合物与金属离子形成的螯合物在510nm处有最大吸收度，用分光光度法进行测定。效果满意，方法简便可靠。

关键词　分光光度法　苦丁茶叶　黄酮

中图分类号　R284.1

Determination of Total Flavone Content in Ilicis Folium Leaf

Zhang Yizhen

（Guangxi College of TCM Nanning 530001）

Li Jianming

（Guangxi Pharm aceutical school 530023）

Abstract　Spectrophotometry was used to determine the total fla vone co ntent in Ilicis Folium leaf according to the fact that the maximum absorbency ca n be obtained when the chelate formed by the combination of flavonoids and metal ion is at 510 nm. The result has shown that the method for determination of the total flavone content in Ilicis Folium leaf is easy to handle and reliable with satisfactory result.

Key words　Spectrphotometry　Ilicis Folium leaf　flavone

苦丁茶主要为冬青科植物枸骨(IlexCornutaLindl)和大叶冬青(IlexlatifilonThunb)的叶〔1〕。分布华东及广西等地。具散风热、清头目、治头痛等功用，常为日常饮茶之用。其所含主要化学成分为鞣质、皂甙、黄酮类〔2〕等成分。本文以芦丁为对照品，用分光光度法测定其含量，效果满意，方法简便可靠。

1　原理

黄酮类化合物与金属离子能形成稳定的呈色螯合物；于510nm处有最大吸收，可用分光光度法进行测定〔3〕。

2　仪器及试剂

采用721A型分光光度计(上海第三分析仪器厂)；芦丁对照品(中国药品生物制品检定所提供)；5%的亚硝酸钠及5%硝酸铝试液；4%氢氧化钠试液；其余实验所用试剂均为分析纯。

3　总黄酮的含量测定

3.1　测定波长的选择

取样品液适量，在0.3ml5%亚硝酸钠存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比，于420～700nm范围内测定螯合物的吸收度；吸收曲线图略。螯合物于510nm处有最大的吸收。故测定时选用此波长。

3.2标准曲线的绘制

分别精密吸取芦丁对照液(0.1mg/ml)0.00,0.50,1.00,2.00,3.00,4.00,5.00ml于10ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至5.00ml，分别加入5%亚硝酸钠试液0.3ml，摇匀，静置6min，再加5%硝酸铝试液0.3ml，摇匀，静置6min，再加4%氢氧化钠试液4.00ml，用60%乙醇释释至刻度，摇匀，静置12min，以试剂作空白，于510nm处测吸收度，得回归方程：Y=0.8734X-0.0151，r=0.9999。

3.3　样品总黄酮的含量测定

精密称取苦丁茶粉末(40目)约3g，加40ml95%乙醇，先泡0.5h，回流提取2h，抽滤，再加40ml95%乙醇回流提取1.5h，抽滤，合并滤液，减压回收乙醇至仅剩5～7ml为止，放100ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。精密吸取样品液1.00ml，置10ml容量瓶中，余下按3.2项下操作，测得吸收度，结果如表1。

表1　样品总黄酮的含量测定结果

编号样品量(g)吸收度样品总黄酮(%)均值(%)RSD(%)1—12.92730.599

2.40

　1—22.98970.6122.412.400.421—33.13050.635

2.38

　2—13.04640.653

2.51

　2—23.03500.6452.492.500.402—33.04250.648

2.49

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3.4　样品加样回收试验

为验证提取方法的可靠性，采用了将同一批的苦丁茶叶粉末(40目)称取8份，每2份作一组，一份加入已知量的芦丁对照品，在与测定方法相同条件下，进行提取和测量，结果如表2。

表2　样品加样回收试验结果

组别样品含量

(mg)加入量

(mg)测得量

(mg)回收率

(%)171.565.8077.41100.06272.054.0076.15100.13374.533.6078.0999.95474.324.7079.0199.99

平均回收率(%)=100.04

RSD=0.06(%)

4　讨论

4.1　为使黄酮提取完全，回流提取后的过滤宜用抽滤，把药渣抽干。但过滤杂质沉淀时，不宜用抽滤。

4.2　经实验证明，乙醇提取液浓缩后加等量水能有效地使杂质沉淀排除干扰。

4.3　样品含量测定结果中，第一批样品的总黄酮含量低于第二批样品，说明苦丁茶叶中总黄酮含量与采收地点、时间等因素有关。

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茶多酚中残留乙酸乙酯的含量测定

茶多酚是从绿茶中提取的多酚类物质，具有很强的清除自由基作用，且具有抗突变、抗癌、抗衰老、抗菌等药理作用，近年来在医疗保健方面引起了广泛的关注。该产品工艺中使用了乙酸乙酯，故应控制残留量。

本文用气相色谱法，选用401有机担体为固定相，乙酸丙酯为内标，对茶多酚及其产品中的残留乙酸乙酯进行了含量测定，该方法操作简便，精密度和回收率均较好，可作为制定质量标准乙酸乙酯控制方法的参考。

一、测定仪器、试药及色谱条件

仪器：日本岛津GC-RIA型气相色谱仪，RPR-GI微处理机。

试药：乙酸乙酯、乙酸丙酯均为分析纯。

色谱条件：401有机担体，玻璃柱：3.2mm×1.6m，FID检测器，进样口及检测器温度：200℃，柱温：160℃，理论塔板数（以乙酸乙酯计算）：863，分离度：4.7。

二、测定的线性范围

对照贮备液的配制精密量取乙酸乙酯适量，置容量瓶中加水制成2μL/mL的溶液。

内标贮备液的配制精密量取乙酸丙酯适量，置容量瓶中加水制成2μL/mL的溶液。

测定方法精密量取对照贮备液5份，各精密加入适量内标溶液，加水制成含对照品浓度为0.1～0.8μL/mL，含内标物浓度为0.4μL/mL的梯度溶液，每份进样1μL，连续进样3次，以浓度与对照品/内标峰面积比值进行回归，得回归方程：Y=2.5070X-0.0293r=0.99997.在0.09005～0.72040mg/mL范围内线性关系良好。

注：配制对照和内标贮备液用体积计算是为了配制方便，在计算时以比重换算，以下同。

三、回收率测定

精密称取已知乙酸乙酯残留量的茶多酚和产品各适量，分别精密加入一定量的对照贮备液，按“样品测定”项下操作，测得茶多酚中乙酸乙酯残留量的回收率为99.41％（n=6），RSD=1.91％，片剂中残留量的回收率为99.48％（n=4），RSD=0.18％

四、精密度试验

分别取一批茶多酚及其产品的供试液，进样1μL，连续进样6次，测得茶多酚中残留乙酸乙酯的平均值为5.30％，RSD=0.41％，产品中残留溶剂的平均值为1.25％，RSD=0.43％。

五、样品测定

对照溶液的配制精密量取对照贮备液和内标贮备液各适量，置同一量瓶中，加水制成含对照品和内标物均为0.4μL/mL的溶液。

供试品溶液的配制

茶多酚：精密称取茶多酚约0.1g，置10mL量瓶中，加内标贮备液，加水制成含内标0.4μL/mL的溶液。

茶多酚产品：取5粒，精密称定，研细，精密称取约相当于0.1g的茶多酚，按“茶多酚”溶液制备项下方法配制溶液。

注：取样量应根据乙酸乙酯残留量而定，应使乙酸乙酯与内标物的峰响应基本一致。

测定方法精密量取对照品溶液和供试品溶液各1μL，注入仪器，连续进样3次，按峰面积计算即得。

测定结果在上述条件下乙酸乙酯和乙酸丙酯能很好分离，无干扰测定峰出现（图1），对3个厂家的茶多酚和2批片剂中的溶剂残留量进行了测定，结果见表1。

样品名称

A

B

C

1

2

含量（W/W ％）

5.71

5.62

5.81

2.12

1.25

RSD（％）

0.57

0.55

0.04

2.06

0.01

茶叶中锂的测定

赖家平　谭昌云　陈伟珍　方　蕾　杜贤新　钟　维　招　龙

摘　要　用火焰原子吸收光谱法测定了茶叶中锂元素的含量。并比较了两种消解茶叶方法的测定结果。实验结果表明，干法比湿法效果要好得多，干法消解的回收率在92.2%～96.1%之间。

关键词：茶叶，锂，火焰原子吸收光谱法(FAAS)。

Determination of Lithium in Tea by FAAS

Lai Jiaping,Tan Changyun,Chen Weizhen,Fang Lei,Du Xianxin,Zhong Wei,Zhao Long

(Zhanjiang Normal College,Zhanjiang　524048)

Abstract　Lithium in tea was determined by flame atomic absorption spectroscopy (FAAS).The results achieved by two sample digestions are compared.It is shown experimently that the ashy-digestion method is superior to watery-digestion method.The recovery ratio of the ashy-digestion is 92.2%～96.1%.

Keywords:Lithium,Tea,Flame atomic absorption spectroscopy.

茶、咖啡、可可并称为世界三大饮料，其中以茶为首。茶叶中含有多种有机成分以及人体必需的微量元素。随着检测技术的发展，近年来人们先后检测出茶叶中含有锌、锰、铜、钙、镁、锶等人体必需的微量元素。［1］而对于锂元素在茶叶中的含量却鲜有提及，且论文很少。据报道，锂元素也是人体必需的微量元素之一。近年来，许多有关神经紊乱症的病例均依靠含有锂元素的药物治疗，而且卓有成效。［1］锂对人体的内分泌系统也有着广泛的影响，锂可以使血液中的血糖降低，可以用以治疗糖尿病。［2］本文用火焰原子吸收光谱法测定了茶叶中锂元素的含量，并比较了两种消解茶叶方法的结果。并根据测定结果讨论了测定方法的可行性。

1　实验部分

1.1　实验仪器

澳大利亚GBC 932 AA原子吸收分光光度计，锂空心阴极灯。马弗炉，可调电炉。

1.2　实验试剂

锂标液储备液(1 g.L-1)：由碳酸锂(光谱分析纯)用HCl溶解配制而得。

锂标准液：由锂标液储备液用亚沸水稀释而得。

1 mol.L-1硝酸溶液(优级纯)；浓硝酸(优级纯)；3% H2O2溶液(分析纯)；高氯酸(优级纯)。

1.3　实验条件

本实验所采用的实验条件见表1。

表1　仪器工作条件

测量波长灯电流狭缝带宽空气流量乙炔流量nmnAnmL.min-1L.min-1670.86.0